Kultur Tisu_pisang

Kultur tisu pisang

Hasil dari satu induk sulur yang dipilih bebas dari penyakit terutama penyakit bawaan tanah kulat fusarium- fusarium oxsyporum cv. cubense

Jenis pisang yang biasa dikultur adalah jenis pisang berangan, pisang mas, pisang rastali, pisang cavendish atau montel dan lain-lain pisang yang mendapat permintaan tinggi di pasaran.

Pisang yang diklon haruslah mempunyai ciri-ciri agronomi yang baik iaitu ciri-ciri pertumbuhan yang tinggi seperti berbuah dengan tandan yang berat, berbuah awal, bebas  atau rintang dari penyakit dan sihat.

Biasanya kerja-kerja pengklonan sulur pisang ni dijalankan di makmal yang mempunyai peralatan yang lengkap seperti bilik media, bilik kultur, bilik pertumbuhan yang bebas kuman dan suhu yang sesuai .

Terdapat 5 peringkat asas dalam kaedah pengklonan atau mikropropagasi ini iaitu :

1- penyediaan bahan kultur – sulur pisang

Terdapat dua jenis sulur pisang iaitu sulur pedang dan sulur air. sulur pedang sesuai dijadikan sulur pisang yang diklon kerana pertumbuhan yang aktif dan subur berbanding sulur air yang kurang subur dan pertumbuhan yang perlahan.

sulur pedang- mempunyai daun yang runcing dan tirus ke atas biasanya boleh mencapai ketinggian sehingga 50sm

sulur air -pertumbuhan daun yang lebar dan tiada perbezaan saiz pangkal dan batang pseudo

http://uq.edu.au/_School_Science_Lessons/UNBiology1.html

Gambar terperinci keratan rentas batang pisang dengan umbisi (corm). bahagian yang perlu adalah umbisi dan seludang daun yang terdapat pertumbuhan tunas  (buds) untuk dikulturkan dalam media.

2-Inisiasi kultur-Pertumbuhan awal kultur

3-Penggandaan

4-Pemanjangan

5-Pembentukan akar

Penyediaan media kultur

Terdapat 3 jenis media bagi kultur tisu pisang iaitu:

1-Media pertumbuhan kultur tanpa hormon

2-Media penggandaan dengan hormon (BAP-benzyilaminopurine)

3-Media dengan penggalak akar -arang teraktif (activated charcoal)

Media atau bahan pertumbuhan kultur mengandungi komposisi /elemen mikro, makro dan vitamin yang sesuai bagi pertumbuhan awal sulur.

Sama ada disediakan melalui penyediaan bahan-bahan  larutan kimia sebagai stok atau menggunakan serbuk yang lengkap dan sedia digunapakai. Media yang digunakan adalah media MS (Murashige & Skoog, 1962).

Bagi pengeluaran klon tisu kultur pisang secara besar-besaran penyediaan media kultur dengan larutan stok adalah diperlukan.

Secara amnya perkara-perkara yang perlu dalam proses  kultur tisu adalah :

1- Ruang pemindahan atau pengkulturan yng bersih bebas kuman atau steril

Perkara penting dalam ruang pengkulturan adalah bersih (steril) dengan menyapu ruang dalam kotak dengan larutan 70% alkohol atau 10% klorox atau larutan peluntur. Semua bahan yang tersedia dalam kotak kultur adalah betul-betul steril. Tangan juga perlu bebas kuman. Peralatan kultur juga boleh direndam dalam larutan 70% alkohol

a-Kebuk wasap udara (laminar air flow)

http://www.omnisterra.com/botany/cp/slides/tc/tc.htm

b-i-menggunakan bekas akuarium ikan

b-ii-kotak plastik

b-iii-kotak kertas yang dibalut plastik

Jar  bekas media yang boleh diautoklaf tahan pada tekanan dan suhu tinggi

Gambar 2 jenis bekas media yang sedia steril

Sumber:http://www.kitchenculturekit.com/StiffAffordablePTCforhobbyists.htm

2-Bekas kultur

Gambar dua jenis forsep yang boleh digunakan

3-Forsep

4-Periuk tekanan tinggi

5-alat penimbang elektronik

pH meter

6- pH meter/ kertas pH

7-Larutan peluntur (clorox)

8- Isopropil alkohol (70%)

9- Air suling steril

Jenis-jenis skapel yang biasa digunakan dalam makmal

10- skapel atau pisau cukur

11-media kultur

Bagi ujian percubaan dirumah boleh menggunakan media ini:

MS 2 liter 2 peket dgn vitamin + 2 peket agar 9 gm /satu + 5ml PPM + satu jns hormon dicadangkan BAP (benzylaminopurine)

Harga termasuk penghantaran US dollar 22

Boleh didapati di laman web

http://www.hometissueculture.org/